在液相色谱仪(堵塞)下,分别就这两点进行讨论。(注:移动相以甲醇为例,色谱柱以C18为例)
堵塞的表现现象是柱压异常升高,直接原因是流动不畅。堵塞的主要位置在色谱柱的前面。主要原因是移动上有杂质,杂质的主要来源是细菌。
堵塞的原因之一:准备移动床时细菌污染。
首先,我们要意识到,普通国产甲醇其实不需要额外的过滤处理,直接使用也没有问题。即使是一些固体粒子杂质也可以排除在液体流动系统前面的过滤头之外,实际上容易引起问题的是水里的细菌。
新准备的纯净水在室内放置几天后会生长细菌,这些细菌肉眼看不见,但足以堵住柱子填料粒子的缝隙,使柱子迅速报废。这就是调配流动相时发生的细菌污染的原因。解决这个问题的方法很简单。是确保水的有用性。
可以通过以下两种方法推荐:
(1)理想的方式当然是购买实验室适用纯水机。方便,有用,质量也可以放心。缺点是价格不容小觑。
(2)用盒子购买500毫升的怡宝或娃哈哈等水,这种水的质量足以满足液调色谱的要求。首先随机抽取一个,做一次细菌板实验,菌落数合格后才能使用。这样一次开一个就可以了,很方便。一次两块钱左右。
其中例如指出一个细节。在大多数书里,每当谈到流动配方时,都会有过滤阶段。但是从我们长期使用的实际效果来看,如果确保数量的质量可以的话,这个阶段可能会被完全清除,也应该被清除。
(1)流动相过滤理论上很好,但实际操作时不能做到专科病适用,因此,反而容易发生的交叉污染比复杂的流动产生更大的影响。
(2)流动相过滤在经济成本上不合算。购买一套过滤器设备需要6000多韩元,过滤器被公认为比较容易损坏的设备。主要是滤芯片的成本太高,一片要几十元。根据普通液柱的正常寿命,滤光器的成本远远高于光谱柱的成本。
(3)流动相过滤对生产力成本没有成本效益。使用溶剂过滤器有预清洗、设备、使用、使用后清洗、干燥的过程,至少需要一个小时。这个费用也不容忽视。(4)在实际工作中,如果没有发现流动相不经过滤,会对柱子寿命产生某些影响。我们至少六年没做了
流动相过滤工作与国内同行相比,使用强度相等,我们柱子的寿命较长。
堵塞的第二个原因:使用移动床时的细菌污染。
移动床没有肠道菌,但使用时发生了细菌污染。(威廉莎士比亚、哈姆雷特、流动相、流动相、流动相、流动相、流动相)这主要是由于使用多元液相色谱仪时的不良使用习惯造成的。
简单的例子:50%的甲醇水流动相,有两种使用方法。一种方法是在登机前混合好,另一种方法是在流程A中加入纯甲醇,在流程B中加入纯水。
从简单的实验效果来看,后者有明显的优势。一,简单,不需要实验者的另一个计算费混合,第二,比例准确,保存时间重复性比较,可以达到很好的实验效果。
但是,它有致命的缺陷。纯净是指在流动相疾病中细菌生长几天。(很多情况下,纯净水不是用作流动相,而是缓冲盐溶液,本身就是优质肥料,细菌生长得更快。)一旦有细菌柱子,就会很快坏掉。所以这种方式要求运营商每次实验都要使用新准备的纯净水,每次实验后都要更换获奖材料,换成甲醇清洗干净。这是认识到在实际工作中,很多人的意识不强。但是,多次使用时,总是会漏掉一两次,但往往会有一两次致命的影响。因为液体色谱仪的堵塞是不可逆转的。